جداسازی، همسانه سازی و بیان فاکتور سلول بنیادی با استفاده از سیستم بیانی پروکاریوتی

Authors

مهسا نایب هاشمی

m. nayebhashemi high institute for research and education in transfusion medicineمرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خون مهشید محمدی پور

m. mohammadi pour high institute for research and education in transfusion medicineاستادیار مرکز تحقیقات انتقال خون ـ مؤسسه عالی آموزشی و پژوهشی طب انتقال خونسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) حسین فهیمی

h. fahimii pharmaceutical sciences branch of islamic azad university (iaups)دانشگاه آزاد اسالمی واحد علوم داروییسازمان اصلی تایید شده: سازمان انتقال خون ایران (blood transfusion research center) مهریار حبیبی رودکنار

m. habibi roudkenar high institute for research and education in transfusion medicineدانشکده پزشکی دانشگاه گیالنسازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی علوم و تحقیقات (islamic azad university science and research branch) محمدعلی جلیلی

abstract

چکیده سابقه و هدف فاکتور سلول بنیادی(scf)، یک گلیکوپروتئین 28 تا 40 کیلودالتونی است که نقش مهمی را در تکثیر و تمایز سلول­های بنیادی خونساز(hscs) بازی می­کند. هدف این مطالعه­ جداسازی، کلونینگ و بیان scf در میزبان بیانیrosetta  بود. rosetta علاوه بر ویژگی­های میزبان بیانی پروکاریوتی، انتظار می رفت با فراهم کردن کدون­های نادر پروتئین­های یوکاریوتی، سطح بیان پروتئین نوترکیب را افزایش دهد. مواد و روش ها مطالعه انجام از نوع تجربی بود. rna تام از سلول های hela استخراج و به دنبال آن cdna ساخته شد. توالی رمزکننده­ scf ، به وسیله آغازگرهای اختصاصی جداسازی و تکثیر شد و با استفاده از وکتور بیانی pet-32a در e.coli top 10 همسانه سازی شد. سازه نوترکیب به وسیله pcr ، هضم آنزیمی و تعیین توالی تایید شد. وکتور نوترکیب در میزبان بیانی rosetta تراریخت شد. بیان  scf نوترکیب در حضور iptg القا شد. بیان فاکتور سلول بنیادی انسانی(hscf) با sds-page و وسترن بلات ارزیابی و تایید شد. یافته ها توالی رمزکننده scf با موفقیت از سلول های hela جداسازی و در وکتور بیانی pet-32a همسانه سازی و بیان پروتئین نوترکیب در میزبان بیانی rosetta انجام شد. نتیجه گیری در سیستم بیانی rosetta ، امکان تولید پروتئین های یوکاریوتی با کدون های نادر مثل agg ، aga ، aua ، cua ، ccc و gga وجود دارد بنابراین به میزان بالایی پروتئین فاکتور سلول بنیادی تولید می شود.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

جداسازی، همسانه‌سازی و بیان فاکتور سلول بنیادی با استفاده از سیستم بیانی پروکاریوتی

چکیده سابقه و هدف فاکتور سلول بنیادی(SCF)، یک گلیکوپروتئین 28 تا 40 کیلودالتونی است که نقش مهمی را در تکثیر و تمایز سلول­های بنیادی خونساز(HSCs) بازی می­کند. هدف این مطالعه­ جداسازی، کلونینگ و بیان SCF در میزبان بیانیRosetta  بود. Rosetta علاوه بر ویژگی­های میزبان بیانی پروکاریوتی، انتظار می‌رفت با فراهم کردن کدون­های نادر پروتئین­های یوکاریوتی، سطح بیان پروتئین نوترکیب را افزایش دهد. مواد و ر...

full text

جداسازی، همسانه سازی و بیان ژن زیرواحد آلفا فیکوسیانین در سیستم بیانی اشرشیاکلی

فیکوسیانین رنگدانه آبی رنگی است که در دو گروه از جلبک ها و سیانوباکترها ازجمله Spirulina وجود دارد. این رنگدانه دارای فعالیت های متنوع زیستی است و کاربردهای گوناگونی در صنعت غذایی، آرایشی و دارویی دارد. پیشرفت های زیادی جهت تولید فیکوسیانین در مقیاس بالا انجام شده است، اما اغلب روش ها مشکل و با هزینه های بالایی قابل انجام هستند؛ درصورتی که همسانه سازی و بیان فیکوسیانین به صورت نوترکیب روشی ارزا...

full text

همسانه سازی پیشبر 2A11 گیاه گوجه فرنگی و بررسی بیان موقت با استفاده از سیستم اگرواینفیلتریشن

بیان موقت ژن­های بیگانه در بافت­های گیاهی برای آنالیز عملکرد ژن در زمان کوتاه روش کارآمدی می­باشد. این روش سریع، انعطاف‌پذیر، ساده و در بافت­های تمایز یافته قابل اجرا است. پیشبر 2A11 از پیشبرهای ویژه بافت میوه گیاه گوجه­فرنگی است که باعث بیان بالای ژن 2A11 در میوه می­شود. هدف از این تحقیق همسانه­سازی پیشبر 2A11 و بررسی بیان آن است. پس از استخراج DNA ژنومی از گیاه گوجه­فرنگی، پیشبر 2A11 با استفا...

full text

همسانه سازی و بررسی بیان موقت پیشبر pat1 گیاه سیب زمینی با استفاده از سیستم اگرواینفیلتریشن

  To achieve the high level of gene expression, promoters are key elements. Patatin promoter has been used as a specific gene expression in potato tubers. Patatin is a group of glycol protein in potato tuber which is code by a multiple family genes. This protein makes up more than 40% of soluble proteins of potato tubers. Class I Promoters mainly responsible for tuber -specific expression patte...

full text

همسانه سازی پیشبر 2A11 گیاه گوجه فرنگی و بررسی بیان موقت با استفاده از سیستم اگرواینفیلتریشن

بیان موقت ژن­های بیگانه در بافت­های گیاهی برای آنالیز عملکرد ژن در زمان کوتاه روش کارآمدی می­باشد. این روش سریع، انعطاف‌پذیر، ساده و در بافت­های تمایز یافته قابل اجرا است. پیشبر 2A11 از پیشبرهای ویژه بافت میوه گیاه گوجه­فرنگی است که باعث بیان بالای ژن 2A11 در میوه می­شود. هدف از این تحقیق همسانه­سازی پیشبر 2A11 و بررسی بیان آن است. پس از استخراج DNA ژنومی از گیاه گوجه­فرنگی، پیشبر 2A11 با استفا...

full text

بیان سازه دکامر لومازین سنتاز با منشأ ‏بروسلایی در سیستم بیانی پروکاریوتی

لومازین سنتاز بروسلایی، آنزیم دخیل در بیوسنتز ریبوفلاوین، مرکب از 10 زیرواحد مشابه می‌باشد که به‌صورت کپسیدی تجمع می یابند. با توجه به کاربردهای وسیع لومازین سنتازها در زمینه‌های بیولوژی، تولید لومازین سنتاز در مقیاس بالا و خالص‌سازی کارآمد آن ضروری می‌نماید. در مطالعه حاضر، ساختار اولیه لومازین سنتاز بروسلا ملی‌تنسیس از پایگاه داده NCBI دریافت گردید. توالی لومازین سنتاز ابتدا با استفاده از واک...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
فصلنامه پژوهشی خون

جلد ۱۴، شماره ۱، صفحات ۵۳-۶۴

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023